1 - Proportion des groupements diéthylaminoéthyls (DEAE : pKa = 9,4) chargés négativement aux pH : 2, 7, 9,4 et 12.
Le pH est donné par la relation suivante :
A pH = 2: log (base /acide) = pH - pKa = 2 - 9,4 = -7,4 donc base/acide = 3,98 10 -6
Sachant que (A) + (B) = 100 % et que (B) = 3,98 10 -6 .(A), on en déduit que
(A) + 3,98 10 -6.(A) = 100
(A) est mis en facteur : (A) = 100 /(1 + 3,98 10-6)
On peut ainsi calculer le pourcentage des formes (A) et (B) : (A) = environ 100 % et (B) = 0 %
A pH = 7: log (base/acide) = pH - pKa = 7 - 9,4 = -2,4 donc base/acide = 3,98 10-3
Sachant que (A) + (B) = 100 % et que (B) = 3,98 10-3.(A), on en déduit que
(A) + 3,98 10-3.(A) = 100
(A) est mis en facteur : (A) = 100 /(1 + 3,98 10-3)
On peut ainsi calculer le pourcentage des formes (A) et (B) : (A) = 99,996 % et (B) = 0,004 %
A pH = 9,4 log (base/acide ) = pH - pKa = 9,4 - 9,4= 0 donc base/acide = 1
Sachant que (A) + (B) = 100 % et que (B) = (A), on en déduit que (A) + (A) = 100
(A) est mis en facteur : (A) = 100 /(2)
On peut ainsi calculer le pourcentage des formes (A) et (B) : (A) = 50 % et (B) = 50 %
A pH = 12 : log (base/acide) = pH - pKa = 12 - 9,4 = 2,6 donc base/acide = 398,1
Sachant que (A) + (B) = 100 % et que (B) +398,1(A), on en déduit que (A) + 398,1(A) = 100
(A) est mis en facteur : (A) = 100 /(1 + 398,1)
On peut ainsi calculer le pourcentage des formes (A) et (B) : (A) = 0,25 % et (B) = 99,75 %
Globalement, on peut donc constater qu'à un pH inférieur au pKa (pH acide), les groupements diéthylaminoéthyls se présenteront majoritairement sous forme acide (-NH+).
À l'inverse, à un pH supérieur au pKa (pH basique), les groupements diéthylaminoéthyls se présenteront majoritairement sous forme basique (-N)
2 - À pH = 7, on a pu calculer que la résine était à 99,996 % sous forme acide, |
chargée positivement.
Ainsi, à pH = 7 la sérumalbumine et l'uréase sont chargées négativement, et seront donc retenues sur la colone. Le chymotrypsinogène ne sera pas retenus.
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