1 - Cet exercice met en jeu une chromatographie échangeuse d'ions. Une résine polystyrénique substituée par des groupements sulfonate (-SO3-) est chargée négativement et est donc une résine échangeuse de cations.
Lorsque le pH est supérieur au pHi (pH > pHi), l'acide aminé est chargé négativement (forme anionique).
Lorsque le pH est inférieur au pHi (pH < pHi), l'acide aminé est chargé positivement (forme cationique).
Le tableau ci-dessous donne les charges des 3 acids aminés, à pH = 2 et à pH = 7.
Lorsque le pH est supérieur au pHi (pH > pHi), l'acide aminé est chargé négativement (forme anionique).
Lorsque le pH est inférieur au pHi (pH < pHi), l'acide aminé est chargé positivement (forme cationique).
Le tableau ci-dessous donne les charges des 3 acids aminés, à pH = 2 et à pH = 7.
| acide aminé : | pHi : | charge à pH = 2 : | charge à pH = 7 : |
| Acide L-Glutamique (Glu) |
3,22
|
+
|
-
|
L-Leucine (Leu)
|
5,98
|
+
|
-
|
L-Lysine (Lys)
|
9,74
|
+
|
+
|
Ainsi, à pH = 2, les trois acides aminés sont chargés positivement, et seront retenus lors du passage sur la colonne.
A pH = 7, seuls Glu et Leu, chargés négativement, seront élués. Lys reste fixé à la colonne.
Glu est élué en premier (pHi = 3,22) puis Leu l'est ensuite (pHi = 5,98).
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